De Coombs-test

Wat is een Coombs-test?

De Coombs-test wordt gebruikt om antilichamen tegen rode bloedcellen (erytrocyten) te detecteren. Voor de bepaling van de antistoffen wordt een zogenaamd Coombs-serum gebruikt, dat wordt verkregen uit het serum van konijnen en wordt gesensibiliseerd voor menselijke antistoffen.
De test wordt gebruikt als hemolytische anemie, resus-incompatibiliteit of kort voordat een bloedtransfusie wordt vermoed. Hemolytische anemie is een vorm van anemie en resus-incompatibiliteit beschrijft een bloedgroep-incompatibiliteit.
Er zijn twee verschillende soorten Coombs-tests, de directe en indirecte test verschillen qua indicatie en uitvoering.

De redenen voor een Coombs-test

De directe Coombs-test wordt gebruikt als hemolytische anemie wordt vermoed. Hemolytische anemie beschrijft bloedarmoede waarbij de bloedcellen door beschadiging voortijdig worden afgebroken.
Bij auto-immuunziekten zoals systemische lupus erythematosus, reumatoïde artritis of chronische lymfatische leukemie worden antistoffen gevormd die gericht zijn tegen de lichaamseigen bloedcellen (zogenaamde erytrocyten). De binding van de antilichamen leidt tot een vroege afbraak van de bloedcellen of tot het samenklonteren van de bloedcellen in de bloedvaten. Beide leiden tot een daling van de hemoglobinewaarde.

Een andere indicatie voor de directe Coombs-test is de ziekte van haemolyticus neonatorum, hier worden antistoffen tegen de resusfactor gevormd in het lichaam van de resus-negatieve moeder. Als het ongeboren kind resus-positief is, kunnen de antilichamen van de moeder in de bloedsomloop van de foetus terechtkomen en daar een verhoogde afbraak van de bloedcellen initiëren. Pasgeborenen vallen op door ernstige bloedarmoede en geelzucht.

De Coombs-test wordt regelmatig gebruikt in de transfusiegeneeskunde. Het wordt gebruikt om bloedgroepen te bepalen vóór een bloedtransfusie (nachttest), waarbij een klein bloedmonster wordt gemengd met verschillende sera uit de bloedgroepen A, B, AB en 0. Als het bloed vloeibaar blijft, is het bloed van de patiënt compatibel met de overeenkomstige bloedgroep. De transfusie kan worden uitgevoerd.

De indirecte Coombs-test kan ook worden gebruikt om te zoeken naar vrije antilichamen in het lichaam van de patiënt (antilichaamonderzoekstest), b.v. tijdens kraamcontroles, ter voorbereiding op een transfusie voor oncologische patiënten of mensen die al een bloedtransfusie hebben gekregen.

Lees hier alles over het onderwerp: Rh-intolerantie.

De voorbereiding

Ter voorbereiding op de Coombs-test worden eerst sera met te testen antilichamen bereid. Ze worden in verschillende reageerbuizen gevuld of op testkaarten aangebracht.

In de dagelijkse klinische praktijk b.v. bij de nachttest zijn er al testkaarten die direct kunnen worden gebruikt. Vervolgens wordt bij de patiënt bloed afgenomen en op de test voorbereid. Afhankelijk van welk type Coombs-test wordt uitgevoerd, heeft men de bloedcellen of het serum (vloeibaar deel van het bloed) van de patiënt nodig.

De reeks

Als een directe Coombs-test wordt uitgevoerd, worden de rode bloedcellen uit het bloed van de patiënt gefilterd. Er moet worden getest of er antilichamen van het IgG-type op zitten, die hemolytische anemie of bloedgroep-incompatibiliteit in het lichaam veroorzaken. Het Coombs-serum bevat antilichamen tegen menselijke IgG-antilichamen. Het mengsel wordt lange tijd verwarmd (geïncubeerd). Als er antilichamen op de rode bloedcellen zitten, klonteren ze en wordt de test positief.

De indirecte Coombs-test bestaat uit twee delen. Het doel is om antilichamen te bepalen die vrij zijn in het bloed en niet zijn gebonden aan bloedcellen.
Dit keer wordt het vloeibare deel (serum) uit het bloed van de patiënt gefilterd. Voor de test worden eerst rode bloedcellen aan het serum toegevoegd. Als er vrije antilichamen in het serum zitten, binden deze zich aan de rode bloedcellen. Deze reactie is niet zichtbaar. Pas in de tweede stap, zoals bij de directe Coombs-test, wordt Coombs-serum met antilichamen tegen menselijke antilichamen toegevoegd en opgewarmd. Ook hier klontert de oplossing als het resultaat positief is.

De evaluatie

Als antilichamen worden gecombineerd met een geschikt Cooms-serum, binden antilichamen in het serum (vloeibare deel van het bloed) zich met de antilichamen van de patiënt. Antilichamen zijn Y-vormig, wat betekent dat ze altijd twee bindingspartners kunnen binden en zo rode bloedcellen met elkaar kunnen verbinden. Er ontstaat een grote opeenhoping van bloedcellen. Deze klonten worden zichtbaar - het bloed agglutineert (klonten) en de test is positief.
Als de patiënt niet over de juiste antilichamen beschikt, blijft het serum vloeibaar. U ziet geen enkele verandering - de test is negatief.

Welke alternatieven zijn er?

Een alternatief voor de Coombs-test is de immunologische ELISA-methode (enzymgekoppelde immunosorbenttest), waarbij bepaalde antilichamen worden gemarkeerd met een enzym. Dit antilichaam wordt aan de testoplossing toegevoegd. Als de gelabelde antilichamen reageren met de antilichamen in de testoplossing, wordt het gebonden enzym geactiveerd en produceert het een kleurstof. Overeenkomstige reageerbuisjes veranderen van kleur - de test is positief.

Naast de ELISA-procedure is er ook de WESTERN-blot, die vaak wordt gebruikt als bevestigingstest voor een positieve ELISA.